目的探究炎性因子白细胞介素34（interleukin-34，IL-34）对大鼠根尖牙乳头干细胞（stem cells from rat apical papilla，SCAP）增殖的影响。方法采用酶消化法分离培养大鼠根尖牙乳头干细胞，流式细胞仪鉴定SCAP表面标记分子，茜素红染色鉴定SCAP成骨分化潜能。将细胞分为实验组（含有不同浓度IL-34的细胞培养液）和对照组（不含IL-34的细胞培养液），四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验检测IL-34对SCAP增殖能力的影响。结果MTT实验结果显示，25 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL IL-34实验组促进SCAP增殖，尤以50 ng/mL IL-34实验组对SCAP增殖的促进作用最显著，而200 ng/mL、400 ng/mL、600 ng/mL IL-34实验组则抑制SCAP增殖。结论IL-34对SCAP的增殖有一定的调节作用，低浓度的IL-34促进SCAP增殖，高浓度的IL-34抑制SCAP增殖。

目的观察大鼠实验性根尖周炎中白细胞介素-35(interleukin-35, IL-35)与叉头样转录因子3(foxhead box p3, Foxp3)的动态表达情况, 探讨IL-35在根尖周炎中的作用。方法选取40只SPF级SD大鼠, 随机分为5组, 单侧下颌第一磨牙开髓进行根尖周炎造模, 分别于术后0、7、14、21、28 d各随机处死一组, 下颌骨拍摄X线片, 观察根尖周变化情况。取下颌第一磨牙根尖周组织进行苏木精-伊红染色(HE)观察其组织病理变化。实时荧光定量PCR反应(real-time qPCR, RT-qPCR)动态检测根尖周病损组织中IL-35和Foxp3 mRNA的表达情况。结果X线和HE染色显示随着牙髓暴露时间的延长, 根尖部炎症程度逐渐加重, 待髓腔开放21~28 d时炎症则趋于稳定, 从临床表现和组织病理学两方面证实了大鼠根尖周炎造模成功。RT-qPCR结果显示: IL-35和Foxp3 mRNA相对表达量在术后不同时期均呈波动性升高趋势(P < 0.01), 术后0~7 d迅速上升, 7~21 d表达量呈下降趋势(P < 0.05), 21~28 d又呈上升趋势(P < 0.05); Pearson相关分析显示: IL-35mRNA与Foxp3mRNA相对表达量呈正相关关系(r=0.609, P < 0.05)。结论IL-35在大鼠根尖周炎中的表达量与炎症程度成反比, 可能通过调控Treg的表达参与根尖周炎的发生发展。

目的探讨白细胞介素-34(IL-34)能否通过调控核因子-кB(NF-кB)影响根尖牙乳头干细胞(SCAPs)增殖、迁移。方法取小鼠中切牙根尖牙乳头组织, 酶消化法传代培养SCAPs; 流式细胞术鉴定SCAPs表面CD44、CD45、CD90以及CSF-1R的表达; 将SCAPs分为4组: 空白对照组、IL-34组(100 ng/mL IL-34)、CSF-1R组(100 ng/mL IL-34+25 ng/mL anti-CSF-1R)和NF-кB组(100 ng/mL IL-34+1 μmol/L BMS-345541);Western blotting分析各组中, 30、60、120 min时SCAPs细胞质、细胞核中p-IкBα、IкBα、p-P65及p65蛋白的相对表达量; Transwell实验分析各组SCAPs迁移能力; 将每组IL-34更换为50 ng/mL, CCK-8分析各组SCAPs增殖变化情况。结果流式细胞术鉴定SCAPs表达CD44、CD90阳性, CD45阴性; SCAPs表面表达CSF-1R;与对照组SCAPs相比, IL-34处理后的SCAPs细胞质、细胞核内p-IкBα、p-P65与细胞质、细胞核中p-P65相对表达量显著增加, SCAPs增殖、迁移能力增强。与IL-34组相比CSF-1R组、NF-кB组内SCAPs增殖、迁移能力降低, SCAPs细胞质、细胞核中p-IкBα、p-P65与胞核中p-P65蛋白表达明显减少。结论IL-34可调节SCAPs中NF-кB信号通路, 并通过NF-кB信号通路调节IL-34的增殖和迁移。

目的:用流式细胞术观察Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ,以及Th1细胞诱导因子IL-12对人外周血中性粒细胞吞噬功能的影响。方法:用不同浓度异硫氰酸荧光素(FITC)在碳酸盐缓冲液(CB,pH9.5)和磷酸盐缓冲盐水(PBS,pH7.2)中标记大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌(金葡菌),流式细胞术检测细菌标记率。取新鲜健康成人外周血与标记细菌于37℃孵育5~20 min后,洗涤和溶血,用流式细胞术检测中性粒细胞吞噬百分率。或外周血预先分别与IL-2、IFN-γ及IL-12孵育2 h,再加标记细菌孵育5 min,流式细胞术检测中性粒细胞吞噬率,并与对照组比较计算吞噬增加比率。结果:FITC标记大肠埃希菌在碱性的CB中标记率较高,而金葡菌在中性的PBS标记率较高(P<0.01)。健康人外周血中性粒细胞对大肠埃希菌和金葡菌的吞噬率在5 min时分别为45%和38%,15~20 min达到平台期,分别为86%~88%和83%~89%。外周血预先用IL-2(20u/ml)、IFN-γ(50 u/ml)或IL-12(30 u/ml)作用后,中性粒细胞对大肠埃希菌的吞噬率分别增加19%、19%和26%;对金葡菌的吞噬率分别增加25%、23%和35%。结论:Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ及Th1型诱导细胞因子IL-12均能增强人中性粒细胞吞噬功能,Th1型细胞因子和IL-12均具有增强中性粒细胞功能的作用。

目的：观察金雀异黄酮(genistein，GEN)对大鼠小脑浦肯野细胞缺血后动作电位编码的影响。方法：采用微电极技术和全细胞膜片钳方法，观察大鼠小脑浦肯野细胞在200mol/L GEN培养10 min后缺血时动作电位编码的变化。结果：缺血诱导大鼠小脑浦肯野细胞序列发放的动作电位峰间距缩短，动作电位峰时程标准差增大，细胞过度兴奋，动作电位编码的精确性降低。GEN能抑制脑缺血后序列发放的动作电位峰间距缩短及动作电位峰时程标准差显著增大。结论：GEN能预防小脑浦肯野细胞的过度兴奋，稳定缺血后细胞动作电位的编码能力。

目的:检测结核病患者外周血中性粒细胞(PMN)体外感染结核分枝杆菌(M.tb)前后表面Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)的表达,并探讨其意义。方法:采用流式细胞仪检测结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达,同时检测正常人PMN表面TLR2和TLR4的表达率;再用M.tb感染结核病患者和正常人外周血,检测PMN表面TLR2和TLR4表达情况。结果:结核病患者外周血感染M.tb前PMN表面TLR2和TLR4表达率明显高于正常人(P0.01);结核病患者和正常人外周血在感染M.tb后PMN表面TLR2和TLR4表达率均较感染前明显降低(P0.01)。结论:结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达和活化有助于机体抵御结核感染,TLR2和TLR4共同参与了宿主对M.tb的免疫应答。